期刊简介
《中国临床医学》杂志(CN 31-1794/R，ISSN 1008-6358;邮发代号4-636)1994年创刊，是中华人民共和国教育部主管、复旦大学附属中山医院主办的临床医学类科技核心期刊，由著名的肝胆外科专家樊嘉教授担任主编，目前为双月刊，主要刊登临床医学、转化医学、生命科学、药学等领域的原创性研究论文，栏目形式多样，包括专家述评、论著、研究快报、短篇论著、技术与方法、临床病理(例)讨论、综述、研究简报、短篇报道、病例报告等。
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首页>中国临床医学杂志
- 杂志名称：中国临床医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学附属中山医院
- 国际刊号：1008-6358
- 国内刊号：31-1794/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏
有效抑制T24细胞survivin表达的小RNA筛选及其载体构建
胡骁轶；武睿毅；王国民
关键词：小干扰RNA, 存活素, 膀胱肿瘤, 质粒栽体
摘要：目的:筛选有效抑制T24细胞survivin表达的siRNA序列,并构建其质粒载体,为后续研究提供基础.方法:设计并合成针对survivin的siRNA,转染T24细胞.用RT-PCR方法测定干扰后细胞survivin mRNA表达,Western-blot方法测定干扰后survivin蛋白表达,比较其抑制率,筛选出有效抑制靶基因表达的siRNA,并构建相应的质粒载体(shRNA).结果:①siRNA转染T24细胞有较高的转染效率;②半定量RT-PCR:1号siRNA干扰T24细胞48 h后survivin基因mRNA表达低,有显著差异(P＜0.05),抑制率70%左右.③Western-blot:1号siRNA干扰T24细胞72 h后survivin蛋白表达低,有显著差异(P＜0.05),抑制率60%左右.④Western-blot方法测定T24细胞转染1号siRNA后连续7 d survivin蛋白表达量变化:干扰后48～96 h survivin蛋白表达量低,有显著差异(P＜0.05).⑤以1号siRNA序列构建质粒栽体并转染T24细胞成功,转染效率较高,质粒本身对细胞无毒无害.结论:①所设计、合成的siRNA中,1号survivin-siRNA对T24细胞survivin表达有明显抑制作用;②根据实验结果构建的质粒裁体及其对照质粒可用于T24细胞转染,供进一步实验研究.
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